Anti-tsiklik sitrulinləşdirilmiş peptid (CCP) antikor ELISA dəsti

Bu dəst, örtük antigeni kimi istifadə edilən təmizlənmiş siklik sitrulinləşdirilmiş peptid antigenləri ilə dolayı üsula əsaslanan insan serum nümunələrində anti-siklik sitrulinləşdirilmiş peptid antikorlarını (CCP antikorları) aşkar edir.

Sınaq prosesi yuxarıda qeyd olunan təmizlənmiş antigenlərlə əvvəlcədən örtülmüş reaksiya quyularına zərdab nümunəsinin əlavə edilməsi ilə başlayır, sonra isə inkubasiya dövrü keçir. Bu inkubasiya zamanı nümunədə CCP antikorları varsa, onlar xüsusi olaraq mikroquyucular üzərində örtülmüş siklik sitrulinləşdirilmiş peptid antigenlərini tanıyacaq və onlara bağlanacaq və sabit antigen-antikor kompleksləri əmələ gətirəcək. Sonrakı addımların düzgünlüyünü təmin etmək üçün reaksiya quyularında bağlanmamış komponentlər yuyulma prosesi vasitəsilə çıxarılır ki, bu da serumdakı digər maddələrin potensial müdaxiləsini aradan qaldırmağa kömək edir.

Sonra ferment konjugatları reaksiya quyularına əlavə edilir. İkinci inkubasiyadan sonra bu ferment konjuqatları xüsusi olaraq mövcud antigen-antikor komplekslərinə qoşularaq, antigen, antikor və ferment konjuqatını özündə birləşdirən daha böyük immun kompleksi əmələ gətirir. Sistemə TMB substratı məhlulu daxil edildikdə, konjugatdakı ferment TMB substratı ilə kimyəvi reaksiyanı kataliz edir, nəticədə görünən rəng dəyişikliyi baş verir. Bu rəng reaksiyasının intensivliyi ilkin serum nümunəsində mövcud olan CCP antikorlarının miqdarı ilə birbaşa bağlıdır. Nəhayət, reaksiya qarışığının udma qabiliyyətini (A dəyəri) ölçmək üçün mikroplata oxuyucusu istifadə olunur. Bu udma dəyərini təhlil etməklə nümunədəki CCP antikorlarının səviyyəsi dəqiq müəyyən edilə bilər ki, bu da müvafiq klinik sınaq və diaqnostika üçün etibarlı əsas yaradır.